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    細(xì)胞運動觀察

    發(fā)布時間: 2023-01-12  點擊次數(shù): 1305次

    簡介

    纖毛與鞭毛是單細(xì)胞或多細(xì)胞生物細(xì)胞表面伸出的特化結(jié)構(gòu),其內(nèi)部是由微管組成的軸(軸中央由 2 條微管組成,外圍由 9 組二聯(lián)微管環(huán)繞),軸的基部與基體相連,周圍被細(xì)胞膜所包繞。直徑為 0.15~0.3 μm,屬于細(xì)胞的運動器官。其運動一般認(rèn)為是由二聯(lián)微管間的滑動所引起,鞭毛運動方式為波浪式、纖毛運動為波動式。

    原理

    細(xì)胞運動觀察實驗的基本原理是纖毛與鞭毛是單細(xì)胞或多細(xì)胞生物細(xì)胞表面伸出的特化結(jié)構(gòu),其內(nèi)部是由微管組成的軸(軸中央由 2 條微管組成,外圍由 9 組二聯(lián)微管環(huán)繞),軸的基部與基體相連,周圍被細(xì)胞膜所包繞。直徑為 0.15~0.3 μm,屬于細(xì)胞的運動器官。其運動一般認(rèn)為是由二聯(lián)微管間的滑動所引起,鞭毛運動方式為波浪式、纖毛運動為波動式。
    暗視野照明法是一種使照射被檢物體的光線不直接進(jìn)入物鏡的照明方法。常用它觀察未染色的活體細(xì)胞或膠體粒子。利用此法,在顯微鏡下觀察時直接看不到通過標(biāo)本的照明光線,而是被檢物反射或衍射的光線進(jìn)入物鏡,可提高分辨率,在暗視野中可以看到明亮的被檢物體的存在和運動,但它們的內(nèi)部結(jié)構(gòu)卻看不清楚。

    材料與儀器

    器材:
    探針、蛙板、大頭針、蠟屑、載玻片、蓋玻片、解剖剪、鑷子、牙簽、吸管、平皿、普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、蟾蜍。
    試劑:

    ①蟾蜍生理鹽水。

    步驟

    基本過程可分為如下幾步:

    (一)觀察蟾蜍上頜黏膜上皮細(xì)胞的纖毛運動

    A 穿刺法處死蟾蜍 取蟾蜍 1 只,左手食指和中指夾住蟾蜍前肢,無名指和小指夾住后肢,大拇指壓住頭部,使頭和軀干呈一定角度。孔手持解剖針,對準(zhǔn)頭和軀干背側(cè)相連的凹陷處(即枕骨大孔),以穿刺法搗毀腦和脊髓。當(dāng)蟾蜍四肢無力下垂時,即表明動物已死。
    B 將蟾蜍腹部向上、固定在蛙板上。
    C 沿蟾蜍兩側(cè)口角向后剪開約 1 cm,將下頜后翻固定在腹部。
    D 在上頜中線距喉頭 1 cm 處放置蠟屑,觀察蠟屑向什么方向移動?記錄蠟屑開始移動到消失的時間。
    E 用眼科剪剪取喉頭前部上頜黏膜組織約 4 mm x 4 mm 小塊,用牙簽挑取剪下的黏膜,將縱切面貼到載片上。
    F 加 1 滴生理鹽水置載玻片的標(biāo)本上,加蓋玻片,光鏡下觀察。

    (二)暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運動

    A 將前面實驗所用蟾蜍沿腹中線剪開,暴露出黃色圓柱狀精巢。
    B 剪取一側(cè)精巢放置盛有自來水的平皿中,用鑷子夾住精巢的一端,清洗血污。
    C 取洗凈的精巢放到另一干凈的平皿上,用眼科剪將精巢充分剪碎后,加入數(shù)滴自來水,混勻。
    D 用吸管吸取平皿內(nèi)液體,滴 1 滴于載玻片上,蓋上蓋玻片,稍待 2~3 min,鏡下觀察。

    注意事項

    1 蟾蜍上頜黏膜上皮細(xì)胞的纖毛運動 低倍鏡下觀察纖毛運動的現(xiàn)象,然后換高倍鏡仔細(xì)觀察纖毛有規(guī)律的運動。
    2 暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運動 低倍鏡下可看到視野中有許多精子,頭部呈長錐形,尾為細(xì)長的線狀結(jié)構(gòu);高倍鏡下,見有許多靠尾部鞭毛彎曲擺動驅(qū)使運動的精子。


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